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混合型生物洗油菌發(fā)酵上清液的表面張力值測定(三)

來源:東北石油大學三亞海洋油氣研究院 黑龍江省科學院微生物研究所 瀏覽 462 次 發(fā)布時間:2025-01-03

實施例2

表面張力測試:采用白金板測定菌株發(fā)酵上清液的表面張力。

將解淀粉芽孢桿菌(Bacillus amyloliquefaciens)ZZ-11、膠凍樣芽孢桿菌(Bacillus mucilaginosus)ZZ-8、混合菌劑(解淀粉芽孢桿菌(Bacillusamyloliquefaciens)ZZ-11和膠凍樣芽孢桿菌(Bacillus mucilaginosus)ZZ-8按1:1數(shù)量比混合)分別接種于LB液體培養(yǎng)基中,在28~30℃條件下振蕩培養(yǎng)發(fā)酵,直至發(fā)酵液中菌落濃度達到108~109

cfu/mL。

分別取上述各組30 mL發(fā)酵菌液,10000×g室溫離心10 min,取各組發(fā)酵上清液,利用表面張力儀測定各組發(fā)酵液的表面張力,測定3次,取平均值,測試結(jié)果如表1所示。

表面張力是洗油劑對原油洗脫能力的重要指標,數(shù)值越低、洗脫能力越強。測試結(jié)果顯示解淀粉芽孢桿菌(Bacillus amyloliquefaciens)ZZ-11和膠凍樣芽孢桿菌(Bacillus mucilaginosus)ZZ-8發(fā)酵上清液均能降低表面張力,混合菌劑發(fā)酵上清液的表面張力值更低。

實施例3

界面張力測試:在45℃下,采用TX500C界面張力儀測定菌株發(fā)酵上清液與原油間的界面張力。

將解淀粉芽孢桿菌(Bacillus amyloliquefaciens)ZZ-11、膠凍樣芽孢桿菌(Bacillus mucilaginosus)ZZ-8、混合菌劑(解淀粉芽孢桿菌(Bacillusamyloliquefaciens)ZZ-11和膠凍樣芽孢桿菌(Bacillus mucilaginosus)ZZ-8按1:1數(shù)量比混合)分別接種于LB液體培養(yǎng)基中,在28~30℃條件下振蕩培養(yǎng)發(fā)酵,直至發(fā)酵液中菌落濃度達到108~109cfu/mL。

分別取上述各組30 mL發(fā)酵菌液,10000×g室溫離心10 min,取各組發(fā)酵上清液,在45℃下,用TX500C界面張力儀進行測定,另取同體積的LB液體培養(yǎng)基作為空白組。當連續(xù)3次讀數(shù)之差在10-3m N/m之內(nèi)時,即可認為測定的體系已經(jīng)達到平衡狀態(tài),記錄最終的界面張力,測試結(jié)果如表2所示。

從表2實驗結(jié)果中可以看出與空白相比解淀粉芽孢桿菌(Bacillusamyloliquefaciens)ZZ-11、膠凍樣芽孢桿菌(Bacillus mucilaginosus)ZZ-8的界面活性好,油水界面低至1.92 mN/m和1.90mN/m,為低界面張力水平?;旌暇鷦┑慕缑婊钚愿鼮橥怀觯椭?.68mN/m。

實施例4

洗油實驗:

將原油與石英砂按照質(zhì)量比為1∶5攪拌均勻制備油砂,放入60℃烘箱中老化24 h,取出密封備用。

將解淀粉芽孢桿菌(Bacillus amyloliquefaciens)ZZ-11、膠凍樣芽孢桿菌(Bacillus mucilaginosus)ZZ-8、混合菌劑(2組,解淀粉芽孢桿菌(Bacillusamyloliquefaciens

)ZZ-11和膠凍樣芽孢桿菌(Bacillus mucilaginosus)ZZ-8按1:1和3:2數(shù)量比混合)分別接種于LB液體培養(yǎng)基中,在28~30℃條件下振蕩培養(yǎng)發(fā)酵,直至發(fā)酵液中菌落濃度達到108~109cfu/mL。

分別將上述各組30 mL發(fā)酵液倒入不同的離心管中,另取同體積30 mLLB液體培養(yǎng)基作為空白組;然后各離心管分別放入上述經(jīng)過老化的15g的油砂(初始油砂含油量為2.5g),密封,均勻震蕩5次后,放入60℃烘箱靜置,24 h后取出。傾倒盡上層液體后,用20~25℃蒸餾水反復(fù)沖洗至水相無色,并收集合并沖洗液。

再將油砂烘干進行稱量(離心管+油砂),質(zhì)量為m1,離心管的質(zhì)量為m0。

洗油效率η通過如下公式進行計算:

η=(15-(m1-m0))/2.5

各組洗油效率測試結(jié)果如表3所示,解淀粉芽孢桿菌(Bacillusamyloliquefaciens)ZZ-11和膠凍樣芽孢桿菌(Bacillus mucilaginosus)ZZ-8發(fā)酵液均具有優(yōu)秀的洗油效率,本發(fā)明混合菌劑的洗油效率更為優(yōu)異,分別達到84.39%和93.32。

綜合實施例1~4的測試結(jié)果說明解淀粉芽孢桿菌(Bacillus amyloliquefaciens)ZZ-11、膠凍樣芽孢桿菌(Bacillus mucilaginosus)ZZ-8均可作為生物洗油菌;本發(fā)明混合菌劑能將油從油砂表面分離開來,洗油后油砂潔凈、松散,有防止原油再粘附的作用,具有十分優(yōu)異的洗油效果。


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